T載體的作用以及克隆時為什麼要用T載體?T載體又叫T質粒載體，是指T4噬菌體DNA連接酶，作用是在有Mg2 、ATP存在的連接緩沖系統中，将分别經酶切的zd載體分子與外源DNA分子進行連接，現在小編就來說說關于T載體的作用以及克隆時為什麼要用T載體?下面内容希望能幫助到你，我們來一起看看吧!
T載體的作用以及克隆時為什麼要用T載體
T載體又叫T質粒載體，是指T4噬菌體DNA連接酶，作用是在有Mg2 、ATP存在的連接緩沖系統中，将分别經酶切的zd載體分子與外源DNA分子進行連接。
DNA連接酶有兩種：T4噬菌體DNA連接酶和大腸杆菌DNA連接酶。兩種DNA連接酶都有将兩個帶有相同粘性末端的DNA分子連在一起的功能，而且T4噬菌體DNA連接酶還有一種大腸杆菌DNA連接酶沒有的特性，即能使兩個平末端的雙鍊DNA分子連接起來。
T4噬菌體DNA 連接酶催化DNA 連接反應内分為3 步：首先，T4 DNA 連接酶與輔因子ATP形成酶-ATP複合物；然後，酶-ATP複合物再結合到具有5’磷酸基和3’羟基切口的DNA上，使DNA腺苷化；最後産生一個新的磷酸二酯鍵，把切口封起來。連接反應通常将兩個不同大小的片斷相連。
形象的說，DNA水解酶相當于剪刀，剪斷DNA，而T載體容（DNA連接酶）就相當于針線。如果克隆時不用，就不能将DNA連接起來。
T載體是聚合酶鍊反應産物的克隆運載體，線性化後兩側3′端各多出一個脫氧胸苷酸(T)。由于PCR産物兩側3′端通常含單個脫氧腺苷酸(A)，與T載體之間的A-T互補性可提高PCR産物克隆的效率。
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