在第334話中，佐助認為大蛇丸已經交給他不少東西，已經沒什麼用了，決定殺掉大蛇丸以免後患。
當時大蛇丸的身體越來越糟了，回憶起三年前中忍考試中的點點滴滴，大蛇丸對佐助的成長贊不絕口。轉生的時刻再次到來，大蛇丸早已對佐助的身體垂涎三尺了，考慮到即将得到佐助，大蛇丸樂的合不攏嘴。但是佐助是不會給大蛇丸得到自己的機會，他突然出現在大蛇丸的門外，毫不客氣的對大蛇丸發起攻擊，聲稱大蛇丸已經沒有什麼可以教自己的，并且自己可以對大蛇丸無情，佐助隐藏多年的實力終于要爆發了。
大蛇丸的真身，白磷大蛇終于出現了，這條大蛇身上的每一片鱗片都是一條白色小蛇，這些蛇不斷的襲擊佐助，佐助開啟了咒印的力量，将無數條小蛇一一斬殺，在佐助面前，曾經羞辱過自己的大蛇丸現在簡直不堪一擊。他卻諷刺地在自己進行轉生的結界内，被佐助吸收及奪去一切力量，留下一副大蛇軀殼。結果因身體極其虛弱，不敵佐助的寫輪眼而被佐助吸收，靈魂與力量被完全壓制。
大蛇丸曾一度因研究轉生之術被發現，企圖占有鼬的身體失敗，這些經曆迫使他不得不選擇對還是雛鳥的佐助動手，結果身為雛鳥的佐助如今終于成為一隻獵鷹，開始了他的複仇之路。
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