1、本作劇情設定在1753年至1783年間，場景主要發生在紐約和波士頓。主角是一位叫康納的英美混血兒，父親是英國人，母親是美國原住民。在《刺客信條3》的開局階段，玩家将體驗康納的父親，到了第四章就會體驗康納的生活，當時他由莫霍克族（原住紐約州的印第安人）撫養長大。在英國殖民者進攻并燒毀了康納的村莊後，他最終走上一條對抗暴政（和聖殿騎士）的道路。本作的故事仍然以刺客組織與聖殿騎士的鬥争為主線。
2、由于故事發生在美國獨立戰争時期，主角将會在遊戲過程中遇到衆多著名曆史人物，喬治·華盛頓、本傑明·富蘭克林、查爾斯·李等人都會悉數登場。其中主角與華盛頓的互動将是本作中的核心關系之一，查爾斯·李将是本作的最終BOSS。
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