高中生物實驗中涉及許多物質檢測與鑒定的顯色方法，其原理多種多樣，不僅有利用氧化還原反應的原理也有利用絡合物的特征等等。在生物實驗中通常會通過一些顔色反應來判斷某項物質的存在，但知識比較零散，不利于記憶和掌握。本文簡單分析了高中生物實驗中的"顔色"，對相關知識進行整理，希望對高中生物學習有所幫助。

01

澱粉鑒定

〖試劑〗：碘液

〖結果〗：藍色

〖原理〗：澱粉能吸附碘，使碘吸收的可見光的波長向短的波長方向移動，棕色的碘液就變成藍色。

〖注意〗：①直鍊澱粉遇碘呈藍色，支鍊澱粉遇碘呈紫紅色。②碘液鑒定澱粉要在30℃及以下的情況進行。将裝有澱粉溶液的試管分别放置在0℃至100℃等不同溫度下觀測，可發現：當溫度30℃時，溶液仍呈現藍色；當溫度在40℃至50℃時，藍色很快褪去；溫度在60℃以上時，則不會出現藍色。

〖應用〗：光合作用的探究曆程中德國植物學家薩克斯利用碘蒸氣鑒定澱粉是光合作用的産物。

02

還原糖鑒定

〖試劑〗：斐林試劑

〖結果〗：磚紅色沉澱

〖原理〗：還原糖中的醛基（-CHO）在加熱條件下能将Cu(OH)2中的銅離子還原成亞銅離子，從而生成磚紅色的Cu2O沉澱物。

〖注意〗：①斐林試劑的甲液和乙液要等量混合均勻後方可使用，而且是現用現配，條件需要水浴加熱，當然化學上是直接将試管在火焰上加熱，隻不過考慮安全問題，水浴加熱更安全，還能受熱均勻。②注意與雙縮脲試劑的濃度區别與使用區别。

〖應用〗：檢驗和檢測某糖是否為還原糖；不同生物組織中含糖量高低的測定；在醫學上進行疾病的診斷，如糖尿病、腎炎。

03

脂肪鑒定

〖試劑〗： 蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ

〖結果〗：蘇丹Ⅲ 脂肪→橘黃色；蘇丹Ⅳ 脂肪→紅色

〖原理〗：脂肪和蘇丹染液有比較強的親和力

〖注意〗：脂肪的鑒定需要用顯微鏡觀察。

〖應用〗：檢測食品中營養成分是否含有脂肪。

04

蛋白質鑒定

〖試劑〗：雙縮脲試劑

〖結果〗：紫色

〖原理〗：在堿性溶液NaOH中，雙縮脲（H2NOC-NH-CONH2）能與Cu2  作用，形成紫色或紫色的絡合物，這個反應叫雙縮脲反應。由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此，蛋白質都可與雙縮脲試劑發生顔色反應，從而用來鑒定蛋白質的存在。

〖注意〗：①雙縮脲試劑在使用時，先加A液再加B液，反應條件為常溫（不需要加熱）。②注意檢測試劑為“雙縮脲試劑“而非”雙縮脲”③雙縮脲試劑之所以能檢測蛋白質，是因為蛋白質有肽鍵（實際上是含有與雙縮脲類似的結構），雙縮脲試劑能檢測含有兩個肽鍵及以上的物質，不能檢測二肽和尿素。

〖應用〗：鑒定某些消化液中含有蛋白質；用于劣質奶粉的鑒定。

05

DNA和RNA染色

〖試劑〗： 甲基綠和吡羅紅（派洛甯）

〖結果〗：甲基綠使DNA呈綠色，吡羅紅使RNA呈紅色

〖原理〗：當甲基綠與吡羅紅作為混合染料時，甲基綠與染色質中DNA選擇性結合顯示綠色或藍色；吡羅紅與核仁、細胞質中的RNA選擇性結合顯示紅色。其原因可能是兩種染料的混合染液中有競争作用，同時兩種核酸分子都是多聚體，而其聚合程度有所不同。甲基綠易與聚合程度高的DNA結合呈現綠色。而吡羅紅則與聚合程度較低的RNA結合呈現紅色。

〖注意〗：甲基綠吡羅紅最好混合使用

〖應用〗：用于觀察DNA和RNA在細胞中的分布

06

線粒體染色

〖試劑〗：健那綠

〖結果〗：藍綠色

〖原理〗：線粒體中細胞色素氧化酶使染料保持氧化狀态(即有色狀态)呈藍綠色，而在周圍的細胞質中染料被還原，成為無色狀态。

〖注意〗：健那綠染液是專一性染線粒體的活細胞染料。

〖應用〗：可以在高倍顯微鏡下觀察線粒體分布和形态規律。

07

細胞死活鑒定

〖試劑〗：台盼藍

〖結果〗：藍色

〖原理〗：正常的活細胞，細胞膜結構完整具有選擇透過性能夠排斥台盼藍，使之不能夠進入胞内；死細胞或細胞膜不完整的細胞，胞膜的通透性增加，可被台盼藍染成藍色。

〖應用〗：區分活細胞和死細胞；檢測細胞膜的完整性。

08

染色體染色

〖試劑〗：堿性染料（ 醋酸洋紅、龍膽紫、改良的苯酚品紅染液）

〖結果〗：醋酸洋紅使染色體呈紫紅色，龍膽紫使染色體呈紫色

〖注意〗：雖然醋酸洋紅、龍膽紫這兩種顔料稱做堿性染料，但其溶液呈酸性。堿性(或酸性)染色劑的界定并非由染料溶液的pH值決定的，而是根據染料物質中助色基團電離後所帶的電荷來決定的。助色基團帶正電荷的染色劑為堿性染色劑（又稱陽離子染料），助色基團帶負電荷的染色劑為酸性染色劑（又稱陰離子染料）。

〖應用〗：用于觀察細胞有絲分裂過程中染色體形态、行為及數量變化。

09

酒精檢測

〖試劑〗：重鉻酸鉀

〖結果〗：灰綠色

〖原理〗：酸性重鉻酸鉀有強氧化性，更易将酒精氧化，生成的硫酸鉻呈灰綠色。

K2Cr2O7 3C2H5OH 4H2SO4——

3CH3CHO(乙醛） K2SO4 Cr2(SO4)3

7H2O

〖注意〗：橙色的重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與酒精發生化學反應。

〖應用〗：探究酵母菌細胞呼吸的方式；制作果酒時檢驗是否産生了酒精；檢查司機是否酒後駕駛。

10

二氧化碳檢測

〖試劑〗： 澄清的石灰水或溴麝香草酚藍水溶液

〖結果〗：CO2可以使澄清的石灰水變混濁，也可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠在變黃。

〖應用〗：根據石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍水溶液變黃的時間長短，可以檢測酵母菌培養液中CO2的産生情況。

11

亞硝酸鹽含量的檢測

〖試劑〗：對氨基苯磺酸

〖結果〗：玫瑰紅

〖原理〗：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應後，與N-1-萘基乙胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料。

〖應用〗：将顯色反應後的樣品與已知濃度的标準液進行目測比較，可以大緻估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。

12

DNA鑒定

〖試劑〗：二苯胺

〖結果〗：藍色

〖原理〗：DNA分子中的脫氧核糖在酸性溶液中變成ω-羟基-γ-酮基戊糖，與二苯胺試劑作用生成藍色化合物。化合物藍色的深淺與DNA的含量成比例關系，可用比色法測定。

〖應用〗：用于DNA的鑒定和DNA含量的定量檢測

13

纖維素分解菌的篩選

〖試劑〗：剛果紅

〖結果〗：紅色

〖原理〗：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成紅色複合物，但并不和水解後的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應。當在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色複合物。當纖維素被纖維素分解菌分解後，剛果紅-纖維素的複合物就無法形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈。

〖應用〗：通過是否産生透明圈來篩選纖維素分解菌

14

大腸杆菌檢測

〖試劑〗：伊紅美藍

〖結果〗：黑色

〖原理〗：在伊紅美藍培養基上，大腸杆菌的代謝産物（有機酸）與伊紅美藍結合使菌落呈現黑色。

〖應用〗：用濾膜法測定水中大腸杆菌的含量

15

篩選能分解尿素的細菌

〖試劑〗：酚類指示劑

〖結果〗：紅色

〖原理〗：在細菌分解尿素的化學反應中，細菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，氨會使培養基的堿性增強，使PH升高，從而使酚紅指示劑變紅。

〖應用〗：在以尿素為唯一氮源的培養基加入酚紅指示劑，培養某種細菌後，看指示劑變紅與否可以鑒定這種細菌能否分解尿素。