1、收集約106細胞，用冷PBS洗2次。
2、4%福爾馬林4℃固定10min左右後塗片，晾幹。
3、以5-10μg/mL hocchst 33258染色5-10min，水沖淨，晾幹後觀察，以紫外光（340nm）激發hocchest。
4、細胞凋亡是指為維持内環境穩定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調控等的作用，它并不是病理條件下，自體損傷的一種現象，而是為更好地适應生存環境而主動争取的一種死亡過程。
5、細胞凋亡有别于細胞壞死，它有一系列的細胞形态學和生物化學的改變，包括出現染色體濃縮、DNA降解、凋亡小體的形成等。在正常的活細胞中，磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine,PS）位于細胞膜内側，但在凋亡細胞中，PS從細胞膜的内側翻轉到細胞膜的表面，暴露在細胞外環境中，Annexin-V（膜聯蛋白-V）是一種分子量為35-36KD的Ca2+的依賴性磷脂結合蛋白，能與PS高親和力結合。因此将Annexin-V進行熒光素（如FITC 、PE）或生物素（biotin）标記，以标記了的膜聯蛋白-V作為探針，利用熒光顯微鏡檢測細胞凋亡的發生。
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